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国内超分辨成像专业排名 超分辨荧光显微成像技术的基本原理

2024-11-12 00:03:24 | 191招生网

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国内超分辨成像专业排名 超分辨荧光显微成像技术的基本原理

超分辨荧光显微成像技术的基本原理

这个问题的答案比较简单:因为组成视网膜的每一个感光细胞(视杆细胞和视锥细胞)、相机芯片上的每一个感光元件(CCD、CMOS等)都是有大小的。比如视网膜中央凹区域的视锥细胞直径平均约为 5 微米。而由于奈奎斯特-香农采样定理的限制,视网膜上能分清的两个相邻像点的距离是视锥细胞直径的两倍,即 10 微米。再结合眼球的构造,大致可以推断出,在距离眼睛 25 厘米的位置,我们能分辨物体上相距为 80 微米的两个点,换算成点阵密度就是大约 320 ppi,这也是苹果所谓“视网膜屏”分辨率的来历。

如果要观察小于 80 微米的物体,比如细菌,就需要先将物体放大,再用眼睛或者相机观察。现代光学显微镜的构造其实非常简单,样品放置在物镜的焦点处,从样品上发射或散射的光经过物镜变成平行(准直)光,再经过一个结像透镜,然后会聚到相机的感光芯片上成像。

按照前面的方法来推算,要区分物体上相距为 200 纳米的两个点,如果使用科研级相机,比如最近火起来的 sCMOS 相机(每个感光像素尺寸为 6.5 微米),只需要使用放大倍率为 65 倍的物镜就足够了。

那么是否可以通过提高物镜的放大倍率来观察低于 200 纳米的物体,比如细胞里面微管呢?

答案是不可以。

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【超分辨率光学成像】I 超分辨光学显微镜简述

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光学显微镜的历史和原理中,早期的显微镜由列文虎克发明,通过物镜和目镜的组合实现细胞观察。物镜的焦距、数值孔径和视场是其关键特性。显微镜的总放大倍数取决于物镜和目镜的配合,不同厂商的标准有所不同,比如Nikon、Olympus、Leica和Zeiss的筒镜焦距要求各异。

共聚焦显微镜利用两个共轭的针孔技术,聚焦平面的光进入探测器,提高图像质量。然而,传统共聚焦显微镜的分辨率仍受限于光学衍射极限,约200纳米。为了突破这个极限,超分辨率光学成像技术如近场扫描光学显微镜(SNOM)和远场超分辨技术(如STED、RESOLFT等)被提出。SNOM利用尖端探针扫描样品表面,获取高分辨率图像,而远场超分辨则通过巧妙方法绕过衍射极限,尽管仍受基础物理规律的限制。

荧光探针在超分辨成像中扮演关键角色,它们的性能优化对于提高成像精度、速度、活细胞成像和成像效率至关重要。后续文章将详细介绍这些技术的详细内容以及荧光探针的优化研究。

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【超分辨率光学成像】I 超分辨光学显微镜简述

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超分辨率光学显微镜是现代科学领域中的关键工具,它们突破了传统光学显微镜的分辨率限制,允许科学家以前所未有的精细度观察微观世界。本文将简述超分辨光学显微镜的核心原理、技术及其应用。

传统光学显微镜的分辨率受限于光的衍射现象,使得在大约200纳米左右达到衍射极限。然而,通过创新技术,科学家们能够实现亚衍射级别的分辨率。近场扫描光学显微镜(SNOM)利用尖端直径远小于光波长的探针,实现纳米级扫描,记录样品表面的近场光强度,从而获得高分辨率图像。另一方面,远场超分辨显微镜技术通过工程设计和物理机制绕过光学衍射极限,例如通过点扩散函数工程、单分子定位或基于莫尔条纹效应的频率调制,达到更高空间分辨率。

荧光探针在超分辨成像中扮演着重要角色。科学家通过优化荧光探针性能,提高定位精度、成像速度和活细胞成像能力。这些技术的应用范围广泛,从生物学、医学到材料科学,都展现出巨大的潜力和价值。

总之,超分辨率光学显微镜的出现极大地扩展了人类对微观世界的认知,为科学研究提供了前所未有的洞察力。随着技术的不断进步,我们期待未来能有更多的发现,推动科学和技术的边界进一步拓展。

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